抗體亞型的鑒定
亞型指的是相同的構(gòu)成方式,但是空間結(jié)構(gòu)不同的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)??贵w亞型,指的是在機體內(nèi)產(chǎn)生的“Y” 構(gòu)型的免疫球蛋白(Ig),基于小分子多肽結(jié)構(gòu)上的差異,可以進一步的進行細(xì)分。
抗體亞型
重鏈
抗體以一個或者多個“Y”字形單體存在,每個“Y”字形單體由 4 條多肽鏈組成,包含兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈。 通常,抗體的種類由重鏈決定。例如哺乳動物Ig的重鏈一共有五種,分別用希臘字母α、δ、ε、γ和 μ 來命名,相對應(yīng)組成的抗體就稱為 IgA、IgD、IgE、IgG 和 IgM。其中,人的γ可以進一步細(xì)分為γ1、γ2、γ3、γ4等亞類,分別對應(yīng)IgG1, IgG2, IgG3和IgG4四個亞型,小鼠γ可以進一步細(xì)分為γ1、γ2a、γ2b、γ3等亞類,分別對應(yīng)IgG1, IgG2a, IgG2b和 IgG3四個亞型。
輕鏈
哺乳動物有兩種輕鏈:λ型和κ型。出于科研的需要,人們也會對輕鏈的亞型進行鑒定。
抗體亞型鑒定的原理是利用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA),測定待測抗體與不同亞型特異性的抗體的結(jié)合情況,找出可以與待測抗體特異性結(jié)合的抗體,由于與待測抗體結(jié)合的抗體的特異性都是已知的,依據(jù)結(jié)合抗體的特異性可以得出待測抗體的亞型。以小鼠抗體亞型的測定為例,利用ELISA測定待測抗體與針對小鼠IgG1、IgG2A、 IgG2B、 IgG3、IgM、λ、κ有特異性的抗體的結(jié)合情況。如果待測抗體抗體可以與針對小鼠IgG1的特異性抗體結(jié)合(通過肉眼觀察顏色深淺或通過測OD值判斷),則該抗體的亞型為IgG1。以此類推,也可以測出輕鏈的亞型。
鑒定方法
目前比較常用的方法是利用試劑盒進行抗體亞型的鑒定,按照試劑盒說明書進行操作,便可以直觀的讀出抗體的亞型。
利用試劑盒鑒定抗體亞型常見問題與解決方法:

表2:常見問題與解決方案
抗體亞型鑒定的意義
不同亞型的抗體在結(jié)構(gòu)上有所區(qū)別,其免疫源性與在體內(nèi)發(fā)揮的作用存在差異,對抗體進行進一步的細(xì)分,并進行抗體亞型鑒定,對于疾病作用機理的研究、抗體藥物的開發(fā)有重要意義。
相關(guān)服務(wù)
抗體亞型鑒定服務(wù):IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3,IgM,IgA的鑒定。
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